Comparative analysis of three methods for HPV DNA detection in cervical samples / Análisis comparativo de tres métodos para la detección del ADN de VPH en muestras de cuello uterino

High risk HPV infection is considered to play a central role in cervical carcinogenesis. HPV DNA testing has shown to be a very useful tool for screening and following cervical infections. The aim of this study was to compare three methods for HPV DNA detection, along with cytology and colposcopy analysis. Cervical samples were collected from 100 sexually active women in Mérida, western Venezuela. HPV infection was screened using Hybrid-Capture 2 (HC2), L1-Nested-PCR and E6/E7-PCR assays. 40% of the samples (40/100) were HPV positive by at least one of the DNA detection methods. HC2 detected HPV in 12% specimens. L1- and E6/E7-PCRs showed 50% sensitivity and 77% specificity.The agreement rate between HC2 and both PCR assays was 65%. Kappa value showed moderate concordance between HC2 and both PCR methods (κ=0.55; CI 95%). Also moderate concordance was seen when L1- and E6/E7-PCRs were compared (κ=0.48; CI 95%). There was a significant association between the Schiller test and E6/E7-PCR (p=0.006) for HPV infection. An acceptable agreement between all three assays for HPV detection was observed. Nevertheless, different PCR formats need to be further analyzed in order to make the right choice of method for HPV testing.

La infección con VPH de alto riesgo es el principal factor etiológico asociado al desarrollo de carcinogénesis cervical y las pruebas de detección de ADN-VPH han mostrado ser una herramienta esencial para la pesquisa y seguimiento de estas infecciones. El objetivo del estudio ha sido comparar tres métodos para la detección del ADN viral, en combinación con los análisis colposcópico y citológico. Se obtuvieron muestras cervicales de 100 mujeres sexualmente activas, en Mérida, Venezuela. La detección de infecciones por VPH se realizó por Captura Híbrida 2 (CH2) y los ensayos de PCR “L1-Nested-PCR” y “E6/E7-PCR”. 40% de las muestras (40/100) fueron positivas para VPH por al menos uno de los métodos aplicados. 12% de las muestras analizadas fueron positivas para VPH por CH2. Las dos PCR utilizadas mostraron un 50% de sensibilidad y 77% de especificidad. La coincidencia observada entre CH2 y las dos PCR fue del 65%. La determinación del valor Kappa mostró una concordancia moderada entre CH2 y ambos métodos de PCR (κ=0,55; CI 95%). También existió concordancia moderada al comparar las PCR de las regiones L1 y E6/E7 de VPH (κ=0,48; CI 95%). Hubo una asociación significativa entre el resultado del test de Schiller y la PCR E6/E7 (p=0,006) para la infección por VPH. Se determinó una concordancia aceptable entre los tres métodos aplicados para la detección de VPH; sin embargo, las PCR deben ser analizadas en trabajos futuros con el fin de establecer las pruebas más adecuadas para la detección viral.

Evaluación de la posible asociación entre la presencia de parásitos intestinales y Helicobacter pylori en población infantil de la etnia Warao, Venezuela / Evaluation of the possible association between the presence of intestinal parasites and Helicobacter pylori in children of ethnic Warao

Las infecciones por microorganismos gastrointestinales constituyen hoy en día una de las principales causas de morbilidad y mortalidad en países en vías de desarrollo. Nos planteamos como objetivo evaluar la posible asociación entre la presencia de parásitos intestinales y la infección por Helicobacter pylori, y el comportamiento de anticuerpos séricos y secretores en una población infantil de la etnia Warao del Edo. Delta Amacuro, Venezuela. La presencia de parásitos se determinó por examen microscópico directo de las heces. Los niveles séricos de IgE total, IgG anti H. pylori e IgA anti Giardia duodenalis; y los secretores IgA total y específica a G. duodenalis y H. pylori en muestra de saliva, se determinaron utilizando el método de ELISA. El 65% de los niños estaban parasitados por protozoarios, observándose un 47% de poliparasitismo. Encontramos una mayor seroprevalencia de H. pylori en el grupo de niños no parasitados (46%) comparado con los parasitados (25%) (P<0,05). Sin embargo, los niños seropositivos a H. pylori y parasitados con G. duodenalis mostraron niveles séricos de IgE total mayores que los no parasitados (P<0,01); en contraparte, los niveles de IgA secretora total y especifica a H. pylori y G. duodenalis estaban disminuidos (P<0,05). Es posible que la respuesta inflamatoria generada por Giardia pueda aumentar los niveles de IgE total y disminuir la respuesta de IgA secretora favoreciendo la instauración de la infección por H. pylori.

The infections for gastrointestinal microorganisms represent nowadays one of the major reasons of morbidity and mortality in developing countries. We had evaluated both, the possible association between the presence of intestinal parasites and infection by Helicobacter pylori, and the production of serum and salivary antibodies in Amerindian Warao children from the Orinoco Delta, Venezuela. The prevalence of parasites was determined by faecal examination. The levels of serum antibodies (total IgE, specific anti- H. pylori IgG and anti G. duodenalis IgA) and salivary antibodies (total and specific IgA to G. duodenalis and H. pylori), was determined by ELISA. 65% of the child population was parasitized by protozoos, and a 47% of polyparasitism was observed. We found a major seroprevalence of H. pylori in the group of children not parasitized (46 %) compared with the parasitized ones (25 %) (P<0.05). Nevertheless, the seropositive children to H. pylori and parasitized with G. duodenalis showed levels of total IgE higher than the non parasitized ones (P<0.01); in contrast, levels of total and specific secretory IgA to H. pylori and G. duodenalis were decreased (P<0.05). It is possible that the inflammatory response generated by G. duodenalis infection may increase levels of total IgE and diminish secretory IgA response favoring the establishment of infection by H. pylori.

Helicobacter pylori cagA and vacA genotypes in Cuban and Venezuelan populations

The aim of this study was to determine the presence of Helicobacter pylori cytotoxin-associated gene (cagA)/vacuolating cytotoxin gene (vacA) among patients with chronic gastritis in Cuba and Venezuela. Gastric antrum biopsies were taken for culture, DNA extraction and PCR analysis. Amplification of vacA and cagA segments was performed using two regions of cagA: 349 bp were amplified with the F1/B1 primers and the remaining 335 bp were amplified with the B7629/B7628 primers. The VA1-F/VA1-R set of primers was used to amplify the 259-bp (s1) or 286-bp (s2) product and the VAG-R/VAG-F set of primers was used to amplify the 567-bp (m1) or 642-bp (m2) regions of vacA. cagA was detected in 87 percent of the antral samples from Cuban patients and 80.3 percent of those from Venezuelan patients. All possible combinations of vacA regions were found, with the exception of s2/m1. The predominant combination found in both countries was s1/m1. The percentage of cagA+ strains was increased by the use of a second set of primers and a greater number of strains was amplified with the B7629/B7628 primers in the Cuban patients (p = 0.0001). There was no significant difference between the presence of the allelic variants of vacA and cagA in both populations. The predominant genotype was cagA+/s1m1 in both countries. The results support the necessary investigation of isolates circulating among the human population in each region.

Presence of human papillomavirus infection determined by hybrid capture assay in cervical lesions in a Venezuelan population

The aim of this study was to establish the presence of HPV infection in cervical lesions in a Venezuelan population, by Hybrid Capture Assay II (HCA II), and its association with cytological diagnosis. The study included 1483 cervical samples analysed at Laboratorios CITOMED, Caracas, Venezuela, from 2005 to 2007. The woman age range was between 20 and 58 years, and the mean age was 28.8. HPV infection was determined using HCA II. The cytological diagnosis of the smears showed LSIL in 1120/1483 samples (75.5 percent), HSIL in 354/1483 (23.9 percent) and ASC-US, in 9/1483 (0.6 percent). The positivity of HPV DNA detected by HCA II was 54.6 percent (811/1483). Of the positives cases, 138/811 (17 percent) presented HPV DNA of low oncogenic risk and 673/811 (82.9 percent) had high-risk HPV. There were significant differences in the low and high oncogenic HPV type frequencies of the evaluated samples (p>0.0001). Low risk HPV types were detected in 127 cases of LSIL, 9 of HSIL and 2 of ASC-US. High-risk HPV was detected in most of the cases: 361 LSIL, 308 HSIL and 4 ASC-US. Our study showed a high presence of cervical infection by human papillomavirus of a high risk genotype. Our results contribute to the epidemiological data that report diversity in the prevalence rates in different countries.

El objetivo de este estudio fue establecer la presencia de la infección por Virus Papiloma Humano en lesiones cervicales de un grupo de pacientes venezolanos, mediante el Ensayo de Captura Híbrida II (ECH II), y su asociación con el diagnóstico citológico. Se analizaron 1483 muestras de citología cervical procesadas en el Laboratorio CITOMED, Caracas, Venezuela desde 2005 hasta 2007. El rango de edad de las mujeres fue entre 20 y 58 años, siendo la edad promedio 28,8 años. Se determinó la presencia de la infección por VPH empleando el método de Ensayo de Captura Híbrida II (ECH II). El diagnóstico citológico de las muestras reveló la presencia de lesiones intraepiteliales de bajo grado (LIE BG) en 1120/1483 (75,5 por ciento) pacientes, lesiones intraepiteliales de alto grado (LIE AG) en 354/1483 (23,9 por ciento) y lesiones con células atípicas de significado indeterminado (ASCUS) en 9/1483 (0,6 por ciento). La positividad de la infección por VPH detectada por ECH II fue de 54,6 por ciento (811/1483). De los casos positivos, 138/811 (17 por ciento) tenían ADN-VPH de bajo riesgo oncogénico y 673/811 (82,9 por ciento) presentaron tipos de VPH de alto riesgo. Las diferencias observadas en la frecuencia de los tipos de VPH de alto y bajo riesgo oncogénicos detectados en las muestras fueron estadísticamente significativas (p<0,0001). VPH de bajo riesgo fue detectado en 127 casos de LIE BG, 9 de LIE AG y 2 de ASC-US, mientras que VPH de alto riesgo fue detectado en la mayoría de los casos: 361 de LIE BG, 308 de LIE AG y 4 de ASC-US. Nuestro estudio demostró una alta presencia de infección por genotipos de VPH de alto riesgo oncogénico. Estos datos contribuyen a establecer el patrón epidemiológico que reporta una gran diversidad en las tasas de prevalencia en diferentes países.

Genotipos vacA de Helicobacter pylori en una población venezolana / Helicobacter pylori vac A genotypes in a Venezuelan population

La infección por Helicobacter pylori está  asociada con gastritis, úlcera gastroduodenal, linfoma tipo Maltoma, y es considerado un importante factor de riesgo para el desarrollo de cáncer gástrico. El objetivo de este estudio fue caracterizar los genotipos vacA de cepas de  H. pylori provenientes de biopsias gástricas de una población venezolana. Se evaluaron 128 pacientes con indicación de endoscopia, por enfermedad de las vías digestivas superiores. Se obtuvieron biopsias gástricas de cada uno de ellos para la amplificación de glm y tipificación de las formas alélicas  de vacA, empleando la reacción en cadena de la polimerasa. Los resultados demostraron que 82 (64%) de las muestras fueron positivas para la amplificación de glm. De estos, 51 (62%) de las cepas tenían el genotipo vacA, forma alélica S1 (17 s1a, 29 s1b, 5 s1a+s1b, 10 fueron no tipificables) y 21 (26%) tenían el subtipo S2. El análisis de la región media de vacA reveló que 42 (51%) fueron vac A m1, 26 (32%) m2 y 14 (17%) no tipificaron para m1  o m2. Los resultados de la presente investigación demostraron una alta frecuencia de infección por  H  pylori  genotipo vac A variante alèlica s1/ m1.

Helicobacter pylori infection is associated with gastritis, gastroduodenal ulcer, and Maltoma type lymphoma, and is also considered an important risk factor for the development of gastric cancer. The purpose of this study was to characterize vacA genotypes of H. pylori strains from gastric biopsies from a Venezuelan population. One hundred and  twenty eight patients who required endoscopy due to disease of the upper digestive system were evaluated. A gastric biopsy was taken from each of them for glm amplification and typing of the allelic vacA  forms, using the polymerase chain reaction assay. Results showed that 82 (64%) of the samples were positive for glm amplification. Of these, 51 (62%) of the strains had the vacA genotype, S1 allelic form (17 sla, 29 slb, 5 sla+slb, 10 were not typable) and 21 (26%) had the S2 subtype. The analysis of the vacA mid region revealed that 42 (51%) were vacA m1, 26 (32%) m2, and 14 did not type for m1 or m2. The results of this investigation showed a high frequency of H. pylori vacA genotype infections, s1/m1 allelic variants.

Genotipificación del virus de papiloma humano en pacientes con condilomas acuminados / Genotyping of human papillomavirus in patients with condylomata acuminata

El condiloma acuminado es una de las enfermedades más comunes de transmisión sexual alrededor del mundo. Estas lesiones están asociadas con la infección por los tipos de Virus de Papiloma Humano (VPH) 6 y 11 de bajo riesgo oncogénico. En nuestro país, la prevalencia de la infección por estos virus es alta (65 %), razón por la cual, el objetivo del presente trabajo fue la detección y tipificación del VPH mediante la reacción en cadena de la polimerasa en un grupo de pacientes que presentaban condilomas acuminados en el área genital. De las 90 biopsias evaluadas, de pacientes con infección sugestiva por el VPH, 72 (80 %) correspondieron a condilomas acuminados según el diagnóstico histopatológico, y el 20% presentaron otras patologías. La infección por el VPH se detectó en los 72 condilomas acuminados, observándose con mayor frecuencia el tipo 6 (54,2 %), seguido del tipo 11 (36,1 %); tres casos (4,2 %) presentaron coinfección con los tipos 6 y 11 y en cuatro casos (5,6 %) no se logró tipificar. Los resultados muestran una clara vinculación entre los tipos de VPH 6 y 11 de bajo riesgo oncogénico y el desarrollo de las verrugas genitales, a diferencia de las neoplasias intraepiteliales.

The condylomata acuminata is one of the common sexually transmitted disease around the world. These lesions are associated with the Human Papillomavirus (HPV) types 6 and 11 of oncogenic low-risk. In our country, the prevalence for this virus infection is high (65 %). The aim of this study was the detection and typing of HPV by polimerase chain reaction (PCR) in a group of patients that presented warts in the genital area. Ninety biopsies were evaluated coming from patients with suggestive infection for the HPV: 72 (80 %) were histological confirmed as condylomata acuminata and 20% have other pathologies. The HPV was detected in all specimens of condylomata acuminate. HPV type 6 was observed with more frequency (54.17 %), followed by type 11 (36.11 %); three cases (4.17%) showed co-infection with types 6 and 11 and four cases (5.56 %) were non tipificable. These results show a clear association of low oncogenic risk HPV types 6 and 11 and the development of the genital warts unlike to the cervical intraepithelial neoplasia where exists a great HPV genotypes spectrum.

La placa dental como reservorio de Helicobacter pylori / Dental plaques as Helicobacter pylori reservoirs

Resumen La placa dental ha sido propuesta como un reservorio para Helicobacter pylori, sugiriéndose que el microambiente oral pueda ser un nicho permanente para la bacteria. El objetivo de este estudio fue determinar el papel que juega la placa dental como reservorio de esta especie, evaluando la presencia de ADN de H. pylori en la placa dental y biopsias gástricas, mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR por sus siglas en inglés). Fueron evaluados 71 pacientes sintomáticos gastrointestinales referidos para examen endoscópico, provenientes del Servicio de Gastroenterología del Hospital Universitario de Caracas, Venezuela y 40 sujetos asintomáticos. Las muestras de placa dental fueron analizadas por PCR, basada en la secuencia del gen ure c. Se tomaron biopsias gástricas para análisis histopatológico y PCR. H. pylori. fue detectado en las biopsias gástricas de 48(68%) de los 71 pacientes, todos con gastritis crónica y en placa dental de 13(18%) de los 71 sujetos. En 8 (17%) de estos 48 pacientes, H. pylori fué también detectado en placa dental. De estos pacientes 4 presentaban adicionalmente displasia y 4 metaplasia. Tres pacientes del grupo control fueron positivos por PCR para H. pylori en placa dental. La placa dental puede ser un reservorio para la bacteria, y su presencia podría representar un factor de riesgo para la reinfección gastrointestinal, posterior al tratamiento de erradicación de la bacteria.

Abstract Dental plaques have been proposed as Helicobacter pylori reservoirs, suggesting that the oral microenvironment can be a permanent niche for the bacterium. The objective of this study was to determine the role played by the dental plaque as reservoir for this species, evaluating the presence of H. pylori DNA in dental plaques and gastric biopsies through the polymerase chain reaction (PCR). The evaluation included seventy-one gastro-intestinal symptomatic patients referred for endoscopic examination by the Gastroenterology Service of the Caracas University Hospital, as well as 40 asymptomatic subjects. The dental plaque samples were analyzed by PCR based on the ure c gene sequence. Gastric biopsies were taken for histopathological analysis and PCR. H. pylori was detected in 48 (68%) gastric biopsies from the 71 patients, all with chronic gastritis, and in the dental plaque of 13 (18%) of the same 71 patients. In 8 (17%) of these 48 patients H. pylori was also detected in dental plaque. Four of these patients also presented displasia and metaplasia. Three patients from the control group were PCR positive for H. pylori in dental plaque. Dental plaques can be a reservoir for these bacteria and their presence could represent a risk factor for gastrointestinal re-infection after treatment for eradicating this bacterium.

Evaluación de las mutaciones del oncogen K-ras 12 en pacientes venezolanos infectados con Helicobacter pylori / Evaluation of K-ras 12 oncogene mutations in Venezuelan patients with Helicobacter pylori infection

En el presente trabajo se evaluó la presencia de mutaciones del gen K-ras 12 en pacientes infectados con H. pylori y su asociación con distintas patologías de las vías gastroduodenales superiores. Se estudiaron 62 pacientes a quienes se les practicó endoscopia digestiva superior, tomando 3 biopsias utilizadas para el estudio histológico, pruebas de biología molecular y la determinación de mutaciones puntuales del gen K-ras 12. Los resultados mostraron una alta incidencia de la infección por H. pylori en pacientes con gastritis crónica activa (GCAc) (90 por ciento), gastritis crónica atrófica (GCAt) (70 por ciento), metaplasia intestinal (MI) (67 por ciento), cambios displásicos (CD) (83 por ciento), disminuyendo en cáncer gástrico (CG) (33 por ciento). En la evaluación de las mutaciones del oncogen K-ras 12 se observó que 68 por ciento de los pacientes presentaron mutaciones en los diferentes aminoácidos analizados. En el codon 12 del gen K-ras, se detectaron mutaciones puntuales simples y combinadas en la misma muestra proveniente de diferentes patologías gástricas, registrándose en los casos de gastritis crónica activa (GCAc) el mayor número de mutaciones, disminuyendo a medida que progresan las etapas de diferenciación histológica hacia cáncer gástrico. Los resultados indicarían que existen mutaciones específicas que pudieran emplearse como marcadores moleculares de malignidad y el eventual desarrollo de cáncer gástrico

Importancia de la respuesta humoral de IgG anti-CagA de helicobacter pylori en pacientes venezolanos con enfermedades de las vías digestivas superiores / Importance of IgG anti-CagA antibodies of Helicobacter pylori in Venezuelan patients with gastric diseases

La infección por Helicobacter pylori está asociada actualmente con diferentes formas de enfermedades digestivas, incluyendo gastritis, úlceras duodenales, gástricas y linfomas del tipo Maltoma. El microorganismo es considerado como un importante factor de riesgo para el desarrollo de cáncer gástrico. El objetivo de este estudio fue caracterizar la respuesta inmune sérica de Inmunoglobulina G (IgG), contra los antígenos CagA, ureasa y extracto total de Helicobacter pylori, en un grupo de pacientes con diferentes formas de enfermedad de las vías digestivas superiores. Fueron evaluados 66 pacientes sintomáticos referidos para examen endoscópico, provenientes del Servicio de Gastroenterología del Hospital Universitario de Caracas, Venezuela. La respuesta inmune fue evaluada mediante ensayo inmunoabsorbente (ELISA) usando antígenos recombinantes para Ureasa y CagA. La infección por Helicobacter pylori fue determinada por el cultivo de las biopsias gástricas y prueba de ureasa. Los resultados mostraron la presencia de H. pylori en 48/66 (72,7 por ciento) pacientes mediante cultivo microbiológico y prueba de ureasa. De los 66 pacientes evaluados en este estudio, 45 (68 por ciento) fueron positivos para el extracto total de H. pylori, 34/66 (51 por ciento) presentaron anticuerpos contra CagA y 18/66 (27 por ciento), tuvieron anticuerpos anti-ureasa. La tasa de positividad de anticuerpos anti-CagA en pacientes con úlcera gástrica, cáncer gástrico, y gastritis crónica fue de 87,8 por ciento, 77,7 por ciento y 40,8 por ciento respectivamente. Del presente estudio se puede concluir que los niveles de anticuerpos anti-Cag A y anti extracto total fueron similares para pacientes con enfermedad gastroduodenal severa, incluyendo, úlcera gástrica y adenocarcinoma

Evaluación de los niveles de IgA secretora anti-helicobacter pylori en poblacion infantil venezolana / Secretory IgA antibody levels against Helicobacter pylori in venezuelan children population

Helicobacter pylori está íntimamente asociado con el desarrollo de enfermedad úlcero-péptica y es un factor de riesgo en cáncer gástrico y MALToma. La IgA secretora es el principal anticuerpo en el sistema de las mucosas, jugando un papel importante como primera línea de defensa contra diferentes antígenos. El objetivo de este trabajo fue evaluar los niveles de IgA secretora específica anti-H. pylori en saliva de un grupo de niños con gastritis crónica histológica. Se evaluaron 30 niños con dolor abdominal recurrente (13 hembras y 17 varones con edad de 2 -15 años, media 7,3 años) provenientes de una consulta privada de la ciudad de Caracas y 30 niños asintomáticos del ambulatorio de la Colonia Tovar. En ambos grupos se realizó evaluación clínica, determina-ción de IgG anti- H. pylori en suero y de IgAs anti-H. pylori en saliva (ELISA). En el grupo sintomático se obtuvieron biopsias gástricas para evaluación histopatológica y prueba rápida de ureasa. En este grupo 53 por ciento de los niños presentaron gastritis crónica. 30 por ciento fueron H. pylori positivo y 23 por ciento H. pylori negativo, 17 por ceinto de los niños presentó gastritis crónica activa H. pylori positivo. Se observó una tendencia al aumento de los niveles de IgAs relacionado con la severidad del hallazgo histológico; siendo estos niveles significativamente (p=0,0307) más elevados en pacientes con gastritis crónica activa H. pylori positivos que en el resto del grupo estudiado. Además; estos valores fueron significativamente más altos (p=0,0408) en pacientes H. pylori positivos con gastritis cróni-ca activa que en pacientes con gastritis crónica. Estos resultados sugieren que los anticuerpos IgA secretores en saliva pueden jugar un papel importante en la inmunidad gástrica frente a la infección por H. pylori, asociado a la cronicidad y fase activa de la gastritis

Pruebas moleculares para la detección del virus papiloma humano: desafíos y posibilidades / Molecular test for detection of human papilloma virus: challengues and possibilities

El uso de sondas moleculares, basadas en la secuencia de los ácidos nucleicos de los organismos, es una de las herramientas más sensibles y específicas disponibles actualmente y por ello se ha empleado extensivamente en la detección, genotipe y evaluación de la carga viral de VPH. Estas metodologías moleculares pueden emplearse en muestras biológicas de distintas entidades: piel, mucosas, semen, moco cervical y orina. La incorporación de las pruebas de VPH como análisis de rutina en la práctica clínica permitirá un mejor diagnósticoy seguimiento de los procesos malignos asociados a este virus, principalmente en los países en vías de desarrollo

Prevalencia de helicobacter pulori en muestras de placa dental de un grupo de pacientes venezolanos, mediante la técnica de reacción en cadena de la polimerasa / Prevalence of helicobacter pylori in a dental plaque sample from a group of Venezuelan patients, by means of polymerase chain reaction

La placa dental ha sido propuesta como un reservorio para Helicobacter pylori, pero la hipótesis de que la placa bucal pueda ser un nicho permanente para la bacteria es muy controversial. El presente estudio tuvo como objetivos: 1.- detectar la presencia de H. pylori en la placa dental de un grupo de pacientes de la población mediante la reacción en cadena de la polimerasa (RCP), y 2.- investigar la relación existente entre la infección por este microorganismo y algunos índices orales. Treinta y dos pacientes provenientes del Hospital Universitario de Caracas con examen endoscópico indicado y 20 sujetos asintomáticos (grupo control) fueron evaluados en esta investigación. La placa subgingival fue analizada usando la RCP para el gen de ureasa. H. pylori fue recuperado de la placa dental de 12/32 (37.5 por ciento) sujetos, 7 de los cuales tenían gastritis crónica. De estos, 4 tenían adicionalmente displasia, uno metaplasia y dos sólo gastritis. Tres pacientes del grupo control fueron positivos por RCP. En este estudio no se demostró correlación de H. pylori con higiene bucal, caries dental, enfermedad periodontal o uso de dentaduras. Se concluye que la cavidad bucal puede ser un reservoio para H. pylori y las secreciones orales vías importantes de transmisión del microorganismo. La presencia de H. pylori en la placa dental puede representar un factor de riesgo para la reinfección gastrointestinal posterior al tratamiento de erradicación de la bacteria

Evaluación de los niveles de IGA secretora en niños con gastritis crónica infectados con helicobacter pylori / Evaluation of the nevel de IGA secretore in children with gastritis chronic infetad with helicobacter pylori

Helicobacter pylori está asociado con el desarrollo de enfermedad úlcero-péptica y es un factor de riesgo en cáncer gástrico y MALToma. La IgA secretora es el principal anticuerpo en el sistema de las mucosas, jugando un papel importante como primera línea de defensa contra diferentes antígenos. Se evaluaron los niveles de IgA secretora específica anti-H.pylori en saliva de un grupo de niños con gastritis crónica histológica. 30 niños con dolor abdominal recurrente (13 hembras y 17 varones con edad de 2-15 años, media 7,3 ñ 3,8) provenientes de una consulta privada de la ciudad de Caracas fueron estudiados. Se realizó evaluación clínica, determinación de IgG amti-H.pylori en suero y de IgAs anti-H.pylori en saliva (ELISA), biopsias gástricas para evaluación histopatológica, prueba rápida de ureasa y se investigó Giardia lamblia en líquido duodenal. 53 por ciento de los niños presentaron gastritis crónica. 30 por ciento fueron H.pylori positivo y 23 por ciento H.pylori negativo, 17 por ciento de los niños presentó gastritis crónica activa H.pylori positivo. Se observó una tendencia al aumento de los niveles de IgA secretora relacionado con la severidad del hallazgo histológico; siendo estos niveles significativamente (p=0,0307) más elevados en pacientes con gastritis crónica activa H.pylori positivos que en el resto del grupo estudiado. Además; estos valores fueron significativamente más altos (p=0,0408) en pacientes H.pylori positivos con gastritis crónica activa que en pacientes con gastritis crónica. Estos resultados sugieren que los anticuerpos IgA secretores en saliva pueden jugar un papel importante en la inmunidad gástrica frente a la infección por H.pylori, asociado a la cronicidad y fase activa de la gastritis

Prevalencia de helicobacter pylori en el estómago y placa dental de una muestra de la población en Venezuela / Prevalence of helicobacter pylori in the stomach and oral plaque of a Venezuelan population sample

Helicobacter pylori ha sido implicado como el principal agente causal en la patogénesis de la gastritis crónica, úlcera péptica y neoplasia gástrica en humanos. El microorganismo ha sido detectado en placa dental, saliva, estómago y heces, pero la hipótesis de que la cavidad bucal pueda ser el reservorio permanente todavía está muy discutida. Para evaluar el potencial de la cavidad bucal en este proceso, se determinó la presencia de este microorganismo en 40 pacientes provenientes del Hospital Clínico Universitario de la UCV, quienes asistían para rutina endoscópica, y en 20 pacientes asintomáticos (grupo control). Se tomaron muestras gástricas y de placa dental y se sembraron en medios selectivos y no selectivos. Las placas fueron incubadas a 37 grados C por 5 días en atmósfera microaerofílica. El requerimiento de microaerofilia, la prueba rápida de ureasa, las pruebas de oxidasa y catalasa y la coloración de Gram fueron consideradas confirmatorias de la presencia del microorganismo. H. pylori fue detectado en 45 por ciento (18/40) de las biopsias de estómago y en 17,5 por ciento (17/40) de las muestras de placa dental por medio de cultivo microbiológico. Se puede concluir que la placa dental puede ser un importante reservorio para H. pylori y la detección de esta bacteria en la cavidad bucal de pacientes con gastritis podria sugerir la vía bucal como una importante fuente de transmisión

Lamividine (3-TC) en el tratamiento de la hepatítis crónica secundaria a infección por virus de la hepatítis B: reporte preliminar en pacientes venezolanos / Lamuvidine (3-TC) in the treatment of chronic hepatitis secundary to hepatitis B virus infection: preliminar report in venezuelan patients

La infección por virus de la hepatítis B (VHB) es una causa importante de enfermedad hepática, tanto aguda como crónica. El interferón alfa (IFN) ha sido desde su introducción inicial a mediados de la década de los 80, el tratamiento de elección para la hepatítis crónica por virus B, siendo los porcentajes de respuesta observandos alrededor del 30 por ciento y 40 por ciento. El IFN se activo contra el VHB principalmente incrementando la citólisis de los hepatocitos infectados por este virus por intermedio de mecanismos de inmunidad celular, por lo necesario que exista un sistema inmune activo para que este medicamento pueda ser efectivo en erradicar el virus B. El lamivudine o 3-TC, un análogo de nucleósido, utilizado inicialmente en el tratamiento de la infección por virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), demostró que administrado a dosis de 100 a 300 mg diarios suprime el VHB-ADN hasta niveles indetectables en el suero de los pacientes infectados. En conclusión el lamivudine a dosis de 150 mg. diarios es seguro y efectivo en el tratamiento de la hepatopatía causada por virus B, logrando la seroconversión del HBeAg a anti Hbe en la mayoría de los casos

Tratamiento de la hepatitis cronica secundaria a infección por virus de la hepatitis c con la combinación de interferon alfa 2b y ribavirina: experiencia preliminar en Venezuela / Secundary chronic hepatitis to virus hepatitis C infection therapy with combination of interferon alpha-2b and ribavirin: preliminary experience in Venezuela

Como es bien sabido el Interferón-Alfa ha sido durante 12 años el único tratamiento para la hepatitis crónica C. Sin embargo sólo un 11 a 18 por ciento de los pacientes presentan una respuesta global (bioquímica y virológica) sostenida con este tratamiento. La Ribavirina, es un análogo de nucleósido que inhibe la replicación de muchos virus, produce una respuesta bioquímica en la mayoría de los pacientes afectados con el virus C, pero su efecto sobre la replicación viral cuando se utiliza como agente único es suficiente. En la literatura mundial, la combinación de Interferón-Ribavirina ha mostrado tener una respuesta sostenida virológica hasta un 49 por ciento. El propósito de este trabajo es mostrar la experiencia usando interferón 2b recombinante (IFN) y Ribavirina en el tratamiento de pacientes venezolanos con hepatitis crónica o cirrosis secundaria a infección por virus C (HCV) recibieron esta terapia combinada. De los pacientes naïve o que no habían sido tratados previamente, el 45 por ciento mostraron una respuesta global (bioquímica y virológica) al final del tratamiento y 43 por ciento de los casos mantuvieron esa respuesta a los 6 meses de haber culminado dicha terapia. En los pacientes de recaída o que previamente habían respondido a un curso de interferón, se observó una respuesta global al final del tratamiento del 100 por ciento, mientras que 71 por ciento de los pacientes mantenían el RNA viral negativo después de 6 meses de haber finalizado el curso programado con la terapia combinada. En el grupo de no respondedores a un curso previo de tratamiento con IFN, 25 por ciento de los mismos mostraron una respuesta global al final del tratamiento, mientras que el 50 por ciento restante no tuvo ningún tipo de respuesta (no respondedores) y en el período de seguimiento post-suspensión del tratamiento, ninguno de estos pacientes mostró una respuesta global o bioquímica sostenida. En conclusión, el uso de la combinación IFN-Ribavirina es superior a la monoterapia con IFN en el tratamiento de la hepatitis crónica secundaria a infección por HCV, fundamentalmente en los pacientes naïve y en recaída luego de un curso previo exitoso de IFN

Significado del ARN viral en ganglios linfáticos procedentes de pacientes infectados por el VIH en terapia antiretroviral / Significance of viral RNA in lymph node procedure of infected HIV patients in antiretroviral therapy

El tejido linfático provee un reservorio para la persistencia del Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH), en terapia antiretroviral (TA) con dos análogos nucleósidos (Zidovudina, Lamivudina) o la combinación anterior más un inhibidor de la proteasa (Indinavir) y con carga viral (CV) plasmática por debajo del límite de detección por Reacción en Cadena de Polimerasa combinada con Transcripción Reversa (RT-PCR) por al menos un año, se les realizó excisión de ganglios linfáticos inguinales y se les solicitó una muestra de semen. El VIH ARN fue extraído de las muestras homogeneizadas y cuantificado por un ensayo de amplificación de ADN. La CV en semen fue indetectable. Tres pacientes con terapia doble (TD), independientemente del valor de linfocitos CD4, tuvieron CV elevadas en ganglios linfáticos. No pudimos detectar replicación viral en 11 de 12 individuos con terapia triple (TT), aún cuando en valor de linfocitos CD4 era menor de 500 células/ml. Esta data antiretrovirales altamente activas es capaz de producir una supresión sostenida del VIH RNA plasmático y de reducir la CV en tejidos linfáticos

Determinación de la carga viral de VIH y su importancia clínica / Determination of viral load of the AIDS and its clinical

La carga viral es la cantidad de virus circulante en la sangre, la cual se reporta usualmente como el número de copias de VIH en un mililitro de sangre. El ensayo de carga viral ha sido utilizado en: 1.-Ciencias Básicas, 2.- En Prognosis la carga viral puede contribuir a predecir la progresión de la enfermedad se ha demostrado que los niveles de virus después de la seroconversión en un individuo recientemente infectado, son un buen marcador del tiempo de desarrollo de SIDA. 3.- En la evaluación del tratamiento la carga viral es el ensayo apropiado para evaluar el éxito terapéutico, y el impacto de las drogas antivirales. Generalmente se recomienda realizar uno o dos ensayos de carga viral antes de iniciar el tratamiento para poder establecer una línea de base. Un tratamiento tendría efecto si fuese capaz de disminuir por lo menos 1/3 de la carga viral establecida en la primera evaluación. Los cambios de carga viral usualmente se describen en escala logarítmica. Por ejemplo: una disminución de 2-log, es una caída de la carga viral de 100 ó 10 a la dos veces el valor anterior. Una disminución de 60,000 copias/mL a 600 copias/mL significa una caída de 2-log. Los valores pueden diferir dependiendo de: edad, sexo, estadío de la enfermedad y medicación. Existen diferencias entre los resultados de distintos laboratorios aún con la misma prueba. Se estima que puede haber una diferencia del 20 por ciento o más en los resultados. Esto se debe básicamente a los distintos métodos y equipos empleados por cada laboratorio. Es indispensable tratar de usar el mismo laboratorio con la misma tecnología con la cual fue evaluada la línea base, para poder tener una consistencia en el seguimiento del paciente. En el mercado existen diversas metodologías para la determinación de carga viral en el plasma de un indivíduo infectado: 1.-AmplicorHIV-1MONITORTMtestKit, fabricado por Roche. 2.- Chiron Quantiplex TM HIV RNA 2.0Assay (bDNA), fabricado por Chiron Corporation. 3.- Digene Hybrid Capture R Microplate Systems HIV RNA Quantitation Assay, fabricado por DIGENE Corporation. 4.- NASBA R HIV-1 RNA QT, Fabricado por Organon Teknika

Uso de antibióticoterapia y evolución de diarreas infantiles producidas por shigella / Use antibiotic treatment and the effect over the acute diarrhea caused by shigella

En el presente trabajo se estudió la etiología de la diarrea aguda infantil y se analizaron los efectos de la antibióticoterapia en la duración de la diarrea aguda causada por Shigella. Fue conducido en el Hospital Materno Infantil de Caricuao, ubicado al oeste de Caracas. Se estudiaron 1358 episodios diarreicos entre el 01 de julio de 1993 y el 31 de mayo de 1995, a los cuales se les practicó un registro clínico diario y un estudio de laboratorio que incluyó: examen microscópico de heces, coprocultivo con su respectivo antibiograma y ensayo inmunoenzimatico (ELISA) para Rotavirus. De los 1358 episodios: 304 (22,38 por ciento) fueron causados por Rotavirus, 216 (15,90 por ciento) por Campylobacter, 110 (8,10 por ciento) por Escherichia coli patógenas (E.coli enteropatógena: 3,40 por ciento, E.coli enterotoxigénica: 4,40 por ciento y E.coli enteroinvasiva: 0,28 por ciento) 30 (2,20 por ciento) de Salmonella y 91 (6,7 por ciento) episodios fueron causados por Shigella. En 80,21 por ciento (73/91) de los casos se aisló Shigella como único agente presente en el coprocultivo. Las especies de Shigella aisladas fueron las siguientes: 49 (67,12 por ciento) de Shigella flexneri, 23 (31,50 por ciento) de Shigella sonnei y 1 (1,32 por ciento) de Shigella boydií. El 47,95 por ciento de los episodios ocurrió en menores de 6 meses, 17,80 por ciento en niños de 6 a 12 meses y 34,25 por ciento en mayores de 1 año. La sintomatología asociada al episodio diarreico incluye: fiebre (65,75 por ciento), vómitos (50,68 por ciento), heces con moco y sangre (64,38 por ciento) y deshidratación moderada o severa (31,50 por ciento). En el tratamiento de las diarreas agudas con antibióticoterapia se utilizaron diferentes combinaciones de antimicrobianos, las más frecuentes fueron: AM-NA (9,3 por ciento), AM-SAM (4,6 por ciento) y AM-CE (4,6 por ciento). El promedio de duración del episodio causado por Shigella fue de 6.9/días; sin embargo, los pacientes tratados con antibióticos tuvieron un promedio de duración de 9.9 días y los pacientes sin antibióticos de 4.03 días, (p<0.0001). El 93,93 por ciento (28/30) de los pacientes que no recibieron antibióticos, 45,45 por ciento (10/22) de los episodios con monoterapia y 19,05 por ciento (4/21) de los casos con terapia combinada se resolvieron entre 1 y 7 días respectivamente (p=0.0018 y p<0.00001)

Presencia de IgG-Anti-helicobacter pylori en mujeres embarazadas y muestras sanguineas de cordon umbilical / The prevalence of IgG anti.H.pylori in pregnant women and serum samples from umbilical cord blood

En 50 sueros obtenidos de sangre venosa de mujeres embarazadas, sin afecciones gastroduodenales, y 50 muestras de sangre cordón umbilical, se analizó la presencia de IgG-anti H.pylori. En el 54 por ciento de las madres, se observaron títulos de IgG anti H.pylori. Todas las muestras de cordón umbilical obtenidas durante el parto del grupo de mujeres seropositivas para H.pylori. El 46 por ciento de las madres fueron negativas para IgG antio H.pylori al igual que las muestras apareadas obtenidas de cordón umbilical. Estos resultados sugieren que existe una transmisión de anticuerpos IgG anti.pylori a través de la barrera placentaria lo cual contribuye a la protección de los recién nacidos en contraer la infección con H.pylori. En la población pediátrica estudiada en edades comprendidas entre 10 meses y 10 años, se determinó la presencia de IgG anti H.pylori en un 62.5 por ciento de los niños, el 37.5 por ciento de esta población infantil fue seronegativa para H.pylori (P<0.0001)(